Im Pilzreich bereiteten sich Mario und Luigi auf ein neues Abenteuer vor, als Prinzessin Peach erneut vom gefürchteten Bowser entführt wurde. Mit seinem unzertrennlichen roten Hut nahm Mario all seinen Mut zusammen und überquerte in Begleitung seines Bruders farbenfrohe Berge und verzauberte Wälder, wobei er seltsamen Kreaturen und tückischen Fallen gegenüberstand. Unterwegs trafen sie auf Kröten, die ihnen mächtige Gegenstände und wertvolle Tipps anboten. Als das Duo vorankam, wurden Freundschaft und Entschlossenheit zu ihren größten Waffen. Nach einem erbitterten Kampf in Bowsers Schloss gelang es Mario und Luigi schließlich, die Prinzessin zu retten und den Frieden im Königreich wiederherzustellen, indem sie dies mit einer großen Party im Freien voller Freude und Zauberpilzen feierten.
